禽白血病病毒抗原ELISA批量凈化檢測試劑盒說明書
產品編號:DWLD001
一、原理
本試劑盒采用直接競爭ELISA方法批量檢測禽白血病病毒抗原。
二、用途
批量檢測蛋清、泄殖腔式子、肝臟、病毒培養液等一批中禽白血病病毒,檢測結果可用于ALV感染的輔助診斷。
三、所需材料
儀器:微孔板酶標儀450 nm/630 nm、振蕩器、離心機、、離心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:單道 1μL~10 μL、10 μL~100μL
多道 50μL~300μL
試劑:去離子水
五、 試劑盒組成
序號 |
組成部分 |
96T裝量 |
1 |
陽性對照酶標板 |
96孔(1-5塊) |
2 |
陽性對照 |
2mL |
3 |
酶標物 |
13 mL |
4 |
底物液A液 |
7 mL |
5 |
底物液B液 |
7 mL |
6 |
終 止 液 |
7 mL |
7 |
20×濃縮洗滌液 |
40 mL |
8 |
2×樣品稀釋液 |
40 mL |
六、溶液配制
配液1: 洗滌工作液
用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。
配液2: 1 ×樣品稀釋液
用去離子水將2 ×樣品稀釋液按1:1體積比進行稀釋。配好的1 ×樣品稀釋液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。
七、樣本前處理
樣本處理前須知:
① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。
② 樣本數目超過8個時推薦使用排槍加樣。
樣本處理:
①蛋清取全蛋,破碎后取蛋清,,置-20℃以下凍融1次,用微量移液器吸取蛋清直接進行檢測。
②泄殖腔拭子用無菌棉簽于待檢雞只泄殖腔取樣后,放入0.5ml 1×樣品稀釋液中,置-20℃以下凍融1次,劇烈震蕩1分鐘,擠出棉簽中的液體,棄棉簽。以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。
③病毒培養液,取病毒培養液以8000r/min離心10分鐘,取上清直接進行檢測。
④肝臟等組織,取約2g加入0.5ml 1×樣品稀釋液,研磨破碎,置-20℃以下凍融1次,以5000r/min離心5分鐘,取上清直接進行檢測。
八、 酶標免疫測定程序
①將所有所需試劑從冷藏環境中取出,待其完全回升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。