青霉素抗原,青霉素抗體應用于膠體金的工藝如下:
標記: ① 青霉素抗體金墊標記條件:
a. 1 ml金液(20nm左右)+(30-35-40-45 ul ) 1%K2CO3+1.5mg/ml 抗體 2.0 ul,標記量為 4-6微克蛋白/ ml 金液。使用時先用保護劑將類抗體稀釋10倍,然后再加到金液中。
b,室溫振蕩.30分
c. 加封閉液20 ul/ml,室溫振蕩. 30分
d. 離心12000轉,8分鐘
e. 100 ul復溶液復溶(PH8.2),鋪金 ,作為金條1號。
① 青霉素加強抗體金墊標記條件:
a. 1 ml金液(20nm左右)+(30-35-40-45 ul ) 1%K2CO3+1.5mg/ml 類抗體 2.0 ul,標記量為 4-6微克蛋白/ ml 金液。
b,室溫振蕩.30分
c. 加封閉液20 ul/ml,室溫振蕩. 30分
d. 離心12000轉,8分鐘
e. 100 ul復溶液復溶(PH8.2),鋪金 ,作為金條2號。
② C線劃線: 羊抗鼠 1:10-1:200
③ T線劃線: 青霉素抗原。1:10-1:200
注意事項:
1,組裝膠體金試紙條時,需要將金條1號和2號 同時按順序粘貼在大板上。
2,每種蛋白抗原的物理性質不同,所以不能用一貫的千篇一律的加氯化鈉的方式看穩定性,要看最終T線顏色的深度。
3, 4個碳酸鉀濃度標記出來的金條,哪個T線最深 就用那個最合適的PH條件,這是王道。
4,當標記時或者吹干后出現發紫,發灰,用保護劑便可解決 。